电影《恐怖9号房》的剧情设定在2024年的美国，一个看似普通的夜晚，主人公艾米丽收到了一封神秘的邀请函，邀请她前往一个名为“9号房”的偏远别墅参加一场未知的聚会。好奇心驱使下，艾米丽踏上了这段充满未知的旅程。

到达别墅后，艾米丽发现参与者们都是素未谋面的陌生人，而别墅内部则透着一股诡异的氛围。随着夜幕降临，诡异的事件开始接连发生。房间内传出莫名的哭泣声，家具会自行移动，甚至有人声称看到了幽灵般的身影。艾米丽开始意识到，这个别墅似乎隐藏着不为人知的秘密。

在探寻真相的过程中，艾米丽逐渐揭开了别墅的恐怖往事，原来这里曾是一处罪恶的实验室，进行过许多非人道的实验。而那些未能逃脱的受害者，他们的怨念和诅咒一直萦绕在别墅之中。艾米丽必须找到逃离的方法，否则她将成为下一个受害者。